La letteratura scientifica attribuisce all’Aloe Arborescens interessanti proprietà antitumorali e per estratti o per molecole isolate da Aloe arborescens è stata descritta attività antimitotica.
Si è voluto verificare se l’attività descritta fosse confermata a concentrazioni certamente non citotossiche e per brevi tempi di esposizione (indice terapeutico) per estratti di Aloe Arborescens preparati secondo il metodo Angel Ariel.
Lo studio è stato condotto con estratti gli di Aloe Arborescens preparati secondo il metodo Angel Ariel nelle loro formulazioni commerciali Serenegel®, Ray®, Lily®.

Modello sperimentale

1. Fibroblasti murini Balb 3T3 (ATCC-CCL163, American Type Culture Collection, Rockville, MD –USA) di origine non tumorale. 2x104 cellule 3T3 vengono seminate in piastre da 96 pozzetti con 200μl di medium Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) addizionato con il 10% (vol/vol) di siero fetale bovino (FCS) ed incubate a 37°C in atmosfera con 5% CO2 e satura di vapore acqueo, coltivate in condizioni standard e cresciute al 50% della confluenza
2. Cellule di endotelio polmonare A549 (ATCC-CCL185, American Type Culture Collection, Rockville, MD –USA) derivanti da tessuto tumorale di polmone umano. 2x104 cellule A549 vengono seminate in piastre da 96 pozzetti con 200μl di medium Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) addizionato con il 10% (vol/vol) di siero fetale bovino (FCS) ed incubate a 37°C in atmosfera con 5% CO2 e satura di vapore acqueo, coltivate in condizioni standard e cresciute al 50% della confluenza.
Entrambe le colture vengono utilizzate al 50% di confluenza, ovvero quando sono ancora in fase proliferativi; vengono quindi esposte ai prodotti in valutazione esattamente pesati, sterilizzati per filtrazione ed adeguatamente diluiti in terreno di coltura a diluizioni scalari comprese tra 1:1000 e 1:5. per 4 e 24 ore. Al termine del tempo di esposizione stabilito il terreno contenente il composto in esame viene rimosso e sostituito con terreno fresco. 

Il controllo è costituito dalla coltura al cui terreno non viene aggiunto alcun composto, ma che subisce gli stessi trattamenti ed è quindi utilizzata come riferimento.

Parametri

Vitalità cellulare. Il numero di cellule vive viene misurato utilizzando un colorante vitale a viraggio cromatico, Sali di tetrazolio (MTT). MTT viene addizionato al terreno di coltura alla diluizione finale 500μg/ml e lasciato in incubazione per 2 ore. Il terreno viene quindi tolto e sostituito con solvente dimetilsolfossido (DMSO) che solubilizza il colorante metabolizzato. Il numero di cellule vive stimato per colorimetria a 570nm. Il valore ottenuto è corretto per l’assorbanza a 630nm (Carmichael J.,et al., 1987). Per ogni campione vengono allestiti almeno 6 punti sperimentali.

Risultati

La misurazione del numero di cellule indica che i composti in esame Ray e Lily, estratti di foglia intera, manifestano effetto antiproliferativo già alla diluizione 1:10 dopo 24 ore di esposizione ed alla diluizione superiore 1:8 dopo 24 ore. Serenegel®, gel di Aloearborescens, possiede attività antiproliferativa solo alla concentrazione massima 1:5 sia dopo 4 ore che 24 ore di esposizione.
Il confronto tra l’attività citotossica e antiproliferativa dimostra che su colture cellulari di fibroblasti Ray®e Lily® ed, in misura minore Serenegel® hanno effetti antiproliferativi ovvero sono in grado di inibire la aberrante proliferazione cellulare a concentrazioni non citotossiche.